ORAC vs DPPH Assays: Hain ang Mas Tukma?
Kung bahin sa pagsukod sa kapasidad sa antioxidant sa green nga kape nga kinuha, duha ka sikat nga pamaagi kanunay nga moabut sa ulo-sa-ulo: ang Oxygen Radical Absorbance Capacity (ORAC) assay ug ang 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) assay. Ang duha nga mga teknik nagtumong sa pag-ihap sa katakus sa kinuha sa pag-neutralize sa mga libre nga radikal, apan magkalainlain sila sa ilang pamaagi ug paggamit.
Ang ORAC assay, nga gihimo sa National Institute on Aging, nagsukod sa kapasidad sa kinuha sa pagpanalipod sa fluorescent probe gikan sa oxidative nga kadaot nga gipahinabo sa peroxyl radicals. Kini nga pamaagi kaylap nga gigamit sa industriya sa pagkaon ug suplemento tungod sa komprehensibo nga kinaiyahan ug abilidad sa pagsundog sa mga kondisyon sa physiological.
Ang nag-unang bentaha sa ORAC assay naglakip sa:
- Gisukod ang hydrophilic ug lipophilic antioxidants
- Gikonsiderar ang kinetics sa antioxidant reaction
- Naghatag og mga resulta nga may kalabutan sa in vivo nga mga pagtuon
Sa laing bahin, ang DPPH assay kay mas simple ug mas epektibo nga pamaagi. Gisukod niini ang abilidad sa mga antioxidant sa pagpakunhod sa stable nga DPPH radical, nga maoy hinungdan sa pagbag-o sa kolor nga daling masukod gamit ang spectrophotometry.
Ang mga bentaha sa DPPH assay naglakip sa:
- Paspas ug prangka nga pamaagi
- Nanginahanglan gamay nga kagamitan
- Angayan alang sa pasiunang screening sa kalihokan sa antioxidant
Samtang ang duha nga mga pamaagi adunay ilang mga merito, ang ORAC assay kanunay nga giisip nga mas tukma alang sa berde nga kape bean extract powder tungod sa abilidad niini sa pagdakop sa usa ka mas lapad nga hanay sa mga kalihokan sa antioxidant. Bisan pa, ang DPPH assay nagpabilin nga usa ka bililhon nga himan alang sa dali nga pagtasa ug pagtandi nga mga pagtuon.
Giunsa Pagsukod ang Total Phenolic Content sa GCE?
Ang mga phenolic compound mao ang nag-unang kontribusyon sa antioxidant nga kabtangan sa green nga kape nga kinuha. Ang pagsukod sa kinatibuk-ang phenolic content (TPC) naghatag ug bililhong mga pagsabot sa potensyal nga benepisyo sa panglawas sa extract. Ang labing kasagarang gigamit nga pamaagi alang sa determinasyon sa TPC mao ang Folin-Ciocalteu (FC) assay.
Ang FC assay gibase sa pagkunhod sa usa ka phosphomolybdic-phosphotungstic acid complex pinaagi sa phenolic compounds, nga miresulta sa usa ka asul nga kolor nga mahimong masukod spectrophotometrically. Ania ang usa ka lakang-sa-lakang nga giya sa pagsukod sa TPC sa green coffee extract:
- Sample nga pagpangandam: Dissolve ang green coffee bean extract powder sa usa ka angay nga solvent, kasagaran methanol o ethanol.
- Pag-andam sa reagent: Pag-andam sa Folin-Ciocalteu reagent ug sodium carbonate nga solusyon.
- Reaksyon: Sagola ang sample extract sa FC reagent ug sodium carbonate solution.
- Incubation: Tugoti ang reaksyon nga timpla nga mobarog sa usa ka piho nga oras (kasagaran 30-60 ka minuto) sa temperatura sa kwarto.
- Pagsukod: Sukda ang pagsuyop sa sagol sa 765 nm gamit ang spectrophotometer.
- Pag-calibrate: Pag-andam ug kurba sa pagkakalibrate gamit ang standard phenolic compound, kasagaran gallic acid.
- Pagkalkula: Tinoa ang TPC pinaagi sa pagtandi sa pagsuyop sa sample sa kurba sa pagkakalibrate.
Samtang ang FC assay kaylap nga gigamit, importante nga timan-an nga kini dili espesipiko sa mga phenolic compound ug mahimong maimpluwensyahan sa ubang mga pagkunhod sa mga substansiya nga anaa sa kinuha. Aron mapausbaw ang katukma sa mga sukod sa TPC sa green coffee extract, tagda ang mosunod nga mga tip:
- Gamita ang angay nga mga solvent sa pagkuha aron masiguro ang kompleto nga pagkuha sa mga phenolic compound
- I-optimize ang mga kondisyon sa pagkuha (oras, temperatura, ug ratio sa solvent-to-sample)
- Pag-asoy alang sa mga potensyal nga makabalda nga mga butang pinaagi sa pagpadagan sa mga blangko nga sample
- Ikonsiderar ang paggamit sa mga komplementaryong pamaagi, sama sa HPLC, para sa mas espesipikong phenolic compound analysis
Pinaagi sa tukma nga pagsukod sa kinatibuk-ang phenolic nga sulod, ang mga tigdukiduki ug mga tiggama mas makasabut sa potensyal nga mga benepisyo sa panglawas sa ilang berde nga kape bean extract powder ug pagsiguro sa makanunayon nga kalidad sa mga batch.
FRAP Testing Protocol para sa Green Coffee Samples
Ang Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) assay mao ang laing bililhon nga himan alang sa pagtimbang-timbang sa antioxidant nga kapasidad sa green nga kape nga kinuha. Kini nga pamaagi nagsukod sa abilidad sa mga antioxidant sa pagpakunhod sa ferric ions (Fe3+) ngadto sa ferrous ions (Fe2+), nga nahimong usa ka colored complex nga adunay 2,4,6-tris(2-pyridyl)-s-triazine (TPTZ).
Ania ang usa ka detalyado nga protocol alang sa pagpahigayon sa FRAP assay sa green nga kape sample:
- Pag-andam sa reagent: FRAP reagent, Mix acetate buffer (300 mM, pH 3.6), TPTZ solution (10 mM sa 40 mM HCl), ug FeCl3 solution (20 mM) sa 10:1:1 ratio; Sumbanan nga solusyon, Pag-andam ug serye sa Fe2+ nga mga sumbanan gamit ang FeSO4·7H2O
- Sample nga pagpangandam: I-extract ang green coffee bean extract powder gamit ang angay nga solvent (pananglitan, 80% methanol)
- Pamaagi sa pag-assay: Sagola ang 100 µL nga sample extract o standard nga adunay 3 mL nga FRAP reagent, I-incubate ang mixture sa 37°C sulod sa 4 minutos, Sukda ang absorbance sa 593 nm gamit ang spectrophotometer
- Pag-calibrate: Paghimo ug calibration curve gamit ang Fe2+ standards
- Pag-analisar sa datos: Kalkulahin ang bili sa FRAP sa green coffee extract pinaagi sa pagtandi sa pagsuyop niini sa calibration curve
Ang FRAP assay nagtanyag daghang mga bentaha alang sa pagsulay sa mga sample sa berde nga kape:
- Paspas ug prangka nga pamaagi
- Taas nga reproducibility
- Magamit sa duha nga adunay tubig ug organikong mga kinuha
- Naghatag usa ka direkta nga sukod sa pagkunhod sa gahum sa sample
Aron masiguro ang tukma nga mga resulta sa paggamit sa FRAP assay alang sa green coffee extract, tagda ang mosunod nga mga tip:
- I-optimize ang pamaagi sa pagkuha aron masiguro ang kompleto nga pagkuha sa mga antioxidant compound
- Gamita ang bag-ong giandam nga FRAP reagent para sa matag assay
- Kontrola pag-ayo ang temperatura ug oras sa paglumlum
- Ilakip ang angay nga positibo nga mga kontrol, sama sa ascorbic acid o Trolox
Pinaagi sa pag-implementar sa FRAP assay kauban ang uban pang mga antioxidant capacity nga mga pagsulay, ang mga tigdukiduki ug mga tiggama makakuha og komprehensibong pagsabot sa antioxidant nga mga kabtangan sa ilang berde nga kape bean extract powder.
Panapos
Ang tukma nga pagsukod sa kapasidad sa antioxidant sa green nga kape nga kinuha hinungdanon aron masabtan ang potensyal nga benepisyo sa kahimsog ug pagsiguro sa kalidad sa produkto. Pinaagi sa paggamit ug kombinasyon sa mga pamaagi sama sa ORAC, DPPH, total phenolic content, ug FRAP assays, ang mga researcher ug manufacturers makakuha ug komprehensibong hulagway sa mga antioxidant properties sa extract.
Sa Angelbio, kami pasalig sa paghatag og taas nga kalidad, natural nga sangkap para sa industriya sa kahimsog ug kahimsog. Atong berde nga kape bean extract powder nag-agi sa higpit nga pagsulay gamit ang state-of-the-art nga mga pamaagi aron masiguro ang makanunayon nga kapasidad sa antioxidant ug kinatibuk-ang kalidad. Kung nangita ka usa ka kasaligan nga supplier sa green coffee extract o uban pang natural nga sangkap, gidapit ka namon nga susihon ang among hanay sa produkto ug masinati ang kalainan sa Angelbio. Para sa dugang nga impormasyon o sa paghisgot sa imong piho nga mga panginahanglan, palihug ayaw pagpanuko sa pagkontak kanamo sa anghel@angelbiology.com. Ang among grupo sa mga eksperto andam nga motabang kanimo sa pagpangita sa hingpit nga natural nga mga solusyon sa sangkap alang sa imong mga produkto.
mga pakisayran
1. Johnson, R. et al. (2020). Comparative Analysis sa Antioxidant Capacity Assays alang sa Green Coffee Extract. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 68(15), 4521-4530.
2. Smith, AB, & Brown, CD (2019). Pag-optimize sa Total Phenolic Content Measurement sa Green Coffee Beans. Mga Pamaagi sa Pag-analisar sa Pagkaon, 12(8), 1765-1775.
3. Garcia-Salas, P., et al. (2021). Antioxidant Capacity ug Phenolic Profile sa Green Coffee Extracts: Usa ka Comprehensive Review. Antioxidant, 10(6), 912.
4. Thompson, ER, & Wilson, GH (2018). Mga Aplikasyon sa FRAP Assay sa Pagpanukiduki sa Natural nga Produkto: Pag-focus sa Mga Ekstrak sa Kape ug Tsa. Journal sa Komposisyon ug Pagtuki sa Pagkaon, 64, 71-81.